Sequence-based typing (SBT) combined with monoclonal antibody subgrouping of Legionella pneumophila isolates is at present considered to be the reference standard during epidemiological investigation of Legionnaires' disease outbreaks. In some isolates of L. pneumophila, the seventh allele of the standard SBT scheme, neuA, is not amplified, because a homologue that is refractory to amplification with the standard neuA primers is present. Consequently, a complete seven-allele profile, and hence a sequence type, cannot be obtained. Subsequently, primers were designed to amplify both neuA and the
СтатьяВалидационное исследованиеПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The presence of sialic acid as a component of cell surface lipooligosaccharides or capsular polysaccharides has been shown to be correlated with the virulence of a number of Gram-negative mucosal pathogens, including several Haemophilus and Neisseria spp. As part of our efforts to evaluate the role of sialic acid in the pathobiology of these organisms, we have initiated studies of the enzymes from Haemophilus ducreyi (the infectious agent of chancroid) responsible for the activation and attachment of sialic acid to the lipooligosaccharide. In this report, we describe results of an investigatio
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоддержка службы здравоохранения СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
In an optimized sorbitol/yeast extract/mineral salt medium up to 12 U/l CMP-N-acetyl-neuraminic-acid (Neu5Ac) synthetase was produced by Escherichia coli K-235 in shake-flask culture. A colony mutant of this strain, E. coli K-235/CS1, was isolated with improved enzyme formation: in shake flasks with a yield of up to 20.8 U/l and 54 mU/mg protein in the cell extract. With this strain 26500 U CMP-Neu5Ac synthetase was produced with a high specific activity (0.128 U/mg) by fed-batch fermentation on 230-l scale. On a 10-1 scale the enzyme yield was 191 U/l culture medium. The enzyme was partially
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
In spite of the axially orientated hydroxy group at C-4, the benzyl alpha-glycoside of N-acetyl-4-epi-D-neuraminic acid (4-epi-NeuAc) is a substrate for sialidases from Vibrio cholerae, Clostridium perfringens, and Arthrobacter ureafaciens, although to an extent which differs depending on the enzyme. Surprisingly, V. cholerae sialidase is by far the slowest acting enzyme; this is in contrast to its usual behavior. Fowl plague virus sialidase and bovine testis sialidase also cleave this glycoside slowly. 4-Epi-NeuAc is not a substrate for N-acetylneuraminic acid aldolase from C. perfringens but
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Siglecs, a family of sialic acid (Sia)-binding immunomodulatory receptors selectively expressed on immune cells, are promising immunotherapeutic targets. While synthetic Sia derivatives can manipulate the Sia-Siglec axis with high affinity, their therapeutic application has been hampered by the poor substrate tolerance of wild-type CMP-sialic acid synthase (CSS) for sterically demanding analogs. Here, we report a structure-guided engineering strategy to evolve Neisseria meningitidis CMP-Sia synthetase (NmCSS) for enhanced activity with bulky substrates. Coupling this optimized NmCSS variant wi
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Cytidine 5'-monophosphate-sialic acid (CMP-Sia) is a donor substrate of all sialyltransferases in both prokaryotes and eukaryotes, and biosynthesized by the CMP-Sia synthetase (CSS or CMAS) using Sia and cytidine 5'-triphosphate (CTP) as the substrates. Since CSSs have unique substrate specificity for Sia species depending on organisms, cells, and organs, and developmental stages, various kinds of CMP-Sia exist in nature. This chapter describes how to quantitatively detect CMP-Sia in the CSS reaction mixture as well as in cells and organs.
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The role of sialylation in kidney biology is not fully understood. The synthesis of sialoglycoconjugates, which form the outermost structures of animal cells, requires CMP-sialic acid, which is a product of the nuclear enzyme CMAS. We used a knock-in strategy to create a mouse with point mutations in the canonical nuclear localization signal of CMAS, which relocated the enzyme to the cytoplasm of transfected cells without affecting its activity. Although insufficient to prevent nuclear entry in mice, the mutation led to a drastically reduced concentration of nuclear-expressed enzyme. Mice homo
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
N-Acetylneuraminic acid cytidyltransferase (CMP-NeuAc synthase) of Escherichia coli K1 is sensitive to mercurials and has cysteine residues only at positions 129 and 329. The role of these residues in the catalytic activity and structure of the protein has been investigated by site-directed mutagenesis and chemical modification. The enzyme is inactivated by the thiol-specific reagent dithiodipyridine. Inactivation by this reagent is decreased in the presence of the nucleotide substrate CTP, suggesting that a thiol residue is at or near the active site. Site-directed mutagenesis of either resid
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Previous studies have reported that insect cell lines lack the capacity to generate endogenously the nucleotide sugar, CMP-Neu5Ac, required for sialylation of glycoconjugates. In this study, the biosynthesis of this activated form of sialic acid completely from endogenous metabolites is demonstrated for the first time in insect cells by expressing the mammalian genes required for the multistep conversion of endogenous UDP-GlcNAc to CMP-Neu5Ac. The genes for UDP-GlcNAc-2-epimerase/ManNAc kinase (EK), sialic acid 9-phosphate synthase (SAS), and CMP-sialic acid synthetase (CSAS) were coexpressed
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПоддержка службы здравоохранения СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The standard sequence-based method for the typing of Legionella pneumophila serogroup 1 strains was extended by using the gspA and neuA alleles. The use of neuA as a seventh allele for typing significantly increased the index of discrimination calculated for a panel of unrelated strains (from 0.932 to 0.963) and subdivided some known large common complexes (e.g., 1,4,3,1,1,1). This modification to the standard method is proposed as the method of choice in the epidemiological investigation of L. pneumophila infections.
Оценочное исследованиеСтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Several unnatural N-acyl neuraminic acids (N-propionyl, N-hexanoyl, N-benzoyl, N-trifluoroacetyl, N-chloroacetyl, N-difluoroacetyl) were prepared enzymatically using immobilised sialic acid aldolase. N-Trifluoroacetyl-, N-chloroacetyl- and N-difluoroacetyl neuraminic acids were shown to enhance up to 10-fold the rate of association of influenza virus A to a sialoglycolipid neomembrane by surface plasmon resonance, and were found to act as weak inhibitors (K(iapp) 0.45-2.0 mM) of influenza virus neuraminidase. The N-propionyl, N-chloroacetyl- and N-difluoroacetyl neuraminic acids were found to
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Methods have been developed for the enzymatic synthesis of complex carbohydrates and glycoproteins containing in the sialic acid moiety the heavy metal mercury or the transition-state analog phosphonate of the influenza C 9-O-acetyl-neuraminic acid esterase-catalyzed reaction. 5-Acetamido-3, 5-dideoxy-9-methylphosphono-beta-D-glycero-D-galacto-nonulopyra nosidonic acid (1), 5-acetamido-3,5-dideoxy-9-methylphosphono-2-propyl-alpha-D- glycero-D-galacto-nonulopyranosidonic acid triethylammonium salt (2), and 5-acetamido-9-thiomethylmercuric-3, 5,9-trideoxy-beta-D-glycero-D-galacto-nonulopyranosid
СтатьяПоддержка правительства СШАПоддержка службы здравоохранения СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Haemophilus ducreyi, the cause of the sexually transmitted disease chancroid produces a lipooligosaccharide (LOS) containing a terminal sialyl N-acetyllactosamine trisaccharide. Previously, we reported the identification and characterization of the N-acetylneuraminic acid cytidylsynthetase gene (neuA). Forty-nine base pairs downstream of the synthetase gene is an open reading frame (ORF) encoding a protein with a predicted molecular weight of 34,646. This protein has weak homology to the polysialyltransferase of Escherichia coli K92. Downstream of this ORF is the gene encoding the H. ducreyi h
СтатьяПоддержка службы здравоохранения СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Group B Streptococcus (GBS) is the foremost cause of neonatal sepsis and meningitis in the United States. A major virulence factor for GBS is its capsular polysaccharide, a high molecular weight polymer of branched oligosaccharide subunits. N-acetylneuraminic acid (Neu5Ac or sialic acid), at the end of the polysaccharide side chains, is critical to the virulence function of the capsular polysaccharide. Neu5Ac must be activated by CMP-Neu5Ac synthetase before it is incorporated into the polymer. We showed previously that a transposon mutant of a serotype III GBS strain which had no detectable c
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоддержка службы здравоохранения СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Loss-of-function genetic screens in model organisms have elucidated numerous biological processes, but the diploid genome of mammalian cells has precluded large-scale gene disruption. We used insertional mutagenesis to develop a screening method to generate null alleles in a human cell line haploid for all chromosomes except chromosome 8. Using this approach, we identified host factors essential for infection with influenza and genes encoding important elements of the biosynthetic pathway of diphthamide, which are required for the cytotoxic effects of diphtheria toxin and exotoxin A. We also i
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.