FEBS letters · 2001
Large-scale purification of functional recombinant human aquaporin-2.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Werten P J, Hasler L, Koenderink J B, Klaassen C H, de Grip W J, Engel A, Deen P M
Аннотация
The homotetrameric aquaporin-2 (AQP2) water channel is essential for the concentration of urine and of critical importance in diseases with water dysregulation, such as nephrogenic diabetes insipidus, congestive heart failure, liver cirrhosis and pre-eclampsia. The structure of human AQP2 is a prerequisite for understanding its function and for designing specific blockers. To obtain sufficient amounts of AQP2 for structural analyses, we have expressed recombinant his-tagged human AQP2 (HT-AQP2) in the baculovirus/insect cell system. Using the protocols outlined in this study, 0.5 mg of pure HT-AQP2 could be obtained per liter of bioreactor culture. HT-AQP2 had retained its homotetrameric structure and exhibited a single channel water permeability of 0.93+/-0.03x10(-13) cm3/s, similar to that of other AQPs. Thus, the baculovirus/insect cell system allows large-scale expression of functional recombinant human AQP2 that is suitable for structural studies.