Применение иммунокаплифного электрофореса для обнаружения аномального прионного белка в мозгу, селезенке и образцах крови у пациентов с болезнью Креуцфельда-Якоба.
Аннотация
Чувствительное и конкретное обнаружение аномального прионного белка в крови может дать диагностический тест или анализ на заболевания животного и человеческого приона. В этой связи описывается применение иммунокаплифного электрофореза (ИКЭ), разработанного для овечьего коктейля, к мозгу, селезенке и крови у пациентов, страдающих болезнью Креуцфельдт-Якоб (CJD). Анализ включает экстракцию органических растворителей, конкурентную иммунизацию с использованием флуоресцентно маркированных синтетических прионовых белковых пептидов и поликлонных антител, специфичных для этих последовательностей, а также анализ с помощью капиллярного электрофореса с использованием лазерного люминесцентного обнаружения. Тест оценивался с использованием клинических образцов крови пациентов, имеющих вариант (n=5) или спорадический (n=4) CJD, и пациентов, которые первоначально подозревались в том, что им был поставлен альтернативный диагноз (n=6). В этом контексте анализ ИКЭ носил конкретный, но неполный характер (55%). Этот метод не позволил обнаружить аномальный прионный протеин в мозгу или эталонных материалах CJD из-за его потери в процессе извлечения.
Название и аннотация на языке оригинала
Application of an immunocapillary electrophoresis assay to the detection of abnormal prion protein in brain, spleen and blood specimens from patients with variant Creutzfeldt-Jakob disease.
Sensitive and specific detection of abnormal prion protein in blood could provide a diagnostic test or screening assay for animal and human prion diseases. Here, the application of an immunocapillary electrophoresis (ICE) method developed for sheep scrapie to brain, spleen and blood from patients with Creutzfeldt-Jakob disease (CJD) is described. The assay involves organic-solvent extraction, a competitive immunoassay using fluorescently labelled synthetic prion protein peptides and polyclonal antibodies specific for those sequences, and analysis by capillary electrophoresis using laser-induced fluorescence detection. The test was evaluated by using clinical blood specimens from patients with variant (n=5) or sporadic (n=4) CJD and patients initially suspected of having CJD who were given an alternative diagnosis (n=6). In this context, the ICE assay was specific, but incompletely sensitive (55%). The method was unable to detect abnormal prion protein in variant CJD brain or spleen reference materials due to its loss during the extraction process.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.