MedElevator
Войти в исследования Детерминанты миокардных каналов натрия (NaV) в мыши, регулируемых при помощи iFGF13.
Аннотация
Посттрансляционное регулирование сердечных каналов NaV1.5 имеет решающее значение для модуляции экспрессии и функции каналов, однако их регулирование путем фосфориляции сопутствующих белков в значительной степени не было изучено. Используя фосфортротеомический анализ комплексов NaV из левых желудочков мыши для взрослых, мы обнаружили девять участков фосфорилации на внутриклеточном фибробластном коэффициенте роста 13 (iFGF13). Чтобы изучить потенциальные роли этих фосфозитов в регулировании сердечных течений NaV, мы отменили выражение iFGF13 в неонатальных и взрослых желудочковых миоцитах мыши и спасли его с помощью диких видов (WT), фосфозилинта или фосфомиметического iFGF13-VY. В то время как возросший уровень неактивации каналов NaV в закрытом состоянии, вызванный нокаутом Fgf13 у взрослых кардиомиоцитов, был полностью восстановлен благодаря аденовальному выражению WT iFGF13-VY, в неонатальных кардиомийотах после вырубления был замечен лишь частичный спасатель. Вырубка iFGF13 в неонатальных желудочковых миоцитах также переместила зависимость канала от напряжения на гиперполяризованные потенциальные возможности, что не было отменено выражением WT iFGF13-VY. Кроме того, мы выяснили, что iFGF13-VY является доминирующей изоформой во взрослых желудочковых миоцитах, в то время как и iFGF13-VY, и iFGF13-S выражаются сопоставимо в неонатальных желудочковых миоцитах. Как и WT iFGF13-VY, каждый из IFGF13-VY Fосфомутантов изучал восстановленные свойства инактивации канала NaV в обеих моделях. И наконец, Fgf13 также увеличил поздний ток Na+ у взрослых кардиомиоцитов, и этот эффект был восстановлен с выражением WT и фосфозилонта iFGF13-VY. Вместе наши результаты показывают, что iFGF13 сильно фосфорилирован и демонстрирует дифференциальное изоформальное выражение в неонатальных и взрослых желудочковых миоцитах. Хотя мы не обнаружили никакой роли для фосфорилации iFFGF13, наши результаты свидетельствуют о различных последствиях iFGF13 для неонатальных и взрослых желудочковых NaV каналов.
Название и аннотация на языке оригинала
Determinants of iFGF13-mediated regulation of myocardial voltage-gated sodium (NaV) channels in mouse.
Posttranslational regulation of cardiac NaV1.5 channels is critical in modulating channel expression and function, yet their regulation by phosphorylation of accessory proteins has gone largely unexplored. Using phosphoproteomic analysis of NaV channel complexes from adult mouse left ventricles, we identified nine phosphorylation sites on intracellular fibroblast growth factor 13 (iFGF13). To explore the potential roles of these phosphosites in regulating cardiac NaV currents, we abolished expression of iFGF13 in neonatal and adult mouse ventricular myocytes and rescued it with wild-type (WT), phosphosilent, or phosphomimetic iFGF13-VY. While the increased rate of closed-state inactivation of NaV channels induced by Fgf13 knockout in adult cardiomyocytes was completely restored by adenoviral-mediated expression of WT iFGF13-VY, only partial rescue was observed in neonatal cardiomyocytes after knockdown. The knockdown of iFGF13 in neonatal ventricular myocytes also shifted the voltage dependence of channel activation toward hyperpolarized potentials, a shift that was not reversed by WT iFGF13-VY expression. Additionally, we found that iFGF13-VY is the predominant isoform in adult ventricular myocytes, whereas both iFGF13-VY and iFGF13-S are expressed comparably in neonatal ventricular myocytes. Similar to WT iFGF13-VY, each of the iFGF13-VY phosphomutants studied restored NaV channel inactivation properties in both models. Lastly, Fgf13 knockout also increased the late Na+ current in adult cardiomyocytes, and this effect was restored with expression of WT and phosphosilent iFGF13-VY. Together, our results demonstrate that iFGF13 is highly phosphorylated and displays differential isoform expression in neonatal and adult ventricular myocytes. While we found no roles for iFGF13 phosphorylation, our results demonstrate differential effects of iFGF13 on neonatal and adult mouse ventricular NaV channels.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.