MedElevator
Войти в исследования DOI 10.3389/fimmu.2023.1060540
Разработка сирийского хомяка против моноколонального антитела (PD-L1) позволяет моделировать иммунную терапию на основе иммунокомпетентного вируса.
Аннотация
ВВЕДЕНИЕ
Иммунные ингибиторы на контрольно-пропускных пунктах (ИПК) революционизировали лечение рака, однако доклиническое тестирование таких гипотез, как комбинированная терапия, было сопряжено с трудностями, отчасти из-за несовпадения видов. Например, одним из немногих известных разрешительных видов животных для онколитических аденовирусов является сирийский хомяк, для которого ICI, главным образом анти-PD-L1 моноколонального антитела (mAb), ранее не был доступен. В этом исследовании мы разработали антисирийский хомяк PD-L1 mAb для оценки безопасности и эффективности при сочетании антиPD-L1 с онколитической аденовирусной кодировкой некроза опухоли альфа (TNFα) и интерлейкина-2 (IL-2) (Ad5/3-E2F-D24-hTNFα-IRES-HIL-2 или TILT-123).
МЕТОДЫ
Рекомбинантный сирийский хомячок PD-L1 был выражен и мыши были иммунизированы для образования mAb с использованием технологии гибридомы. Клональный отбор на основе обязательных и функциональных исследований in vitro, в силико и в vivo выявил клон антиPD-L1 11B12-1 в качестве основного кандидата mAb для моделирования иммунной терапии. Затем в рамках сирийской модели хомяка поджелудочной аденокарсиномы (PDAC) был проведен анализ комбинированного подхода к онколитическим вирусам (ОВ) и ИКИ с использованием 11B12-1 и TILT-123. МЕРОПРИЯТИЯ: Супернататы из гибридомного подклина 11B12B4 дали самый высокий положительный сигнал PD-L1 на сирийских хомячках PBMC и трех линиях раковых клеток (HT100, HapT1 и HPMC1). Сокультура in vitro выявила более совершенные иммунные модернизированные профили клеточной линии, совпадающие с опухолью HT100, проникающие в лимфоциты при использовании подкланов 7G2, 11B12 и 12F1. Epitope binning и эпитопное прогнозирование с использованием AlphaFold2 и ColabFold выявили два отдельных функциональных эпитопа для клонов 11B12-1 и 12F1-1. Отношение к сирийским хомякам с опухолью HapT1 с 11B12-1 значительно лучше (p<0.05) контроль за ростом опухоли, чем контроль изотипа на день 12. 12F1-1 не вызвал существенного контроля за ростом опухоли. Сочетание 11B12-1 с онколитической аденовирусной TILT-123 еще больше улучшило контроль за ростом опухолей по сравнению с монотерапией (p<0.05) на 26 день.
ВЫВОДЫ
Новый клон сирийского хомяка против PD-L1 11B12-1 вызывает контроль за ростом опухолей в модели хомяка PDAC. Сочетание 11В12-1 с онколитической аденовирусной TILT-123 еще больше улучшает контроль за ростом опухолей и демонстрирует хорошие характеристики безопасности и токсичности.
Название и аннотация на языке оригинала
Development of a Syrian hamster anti-PD-L1 monoclonal antibody enables oncolytic adenoviral immunotherapy modelling in an immunocompetent virus replication permissive setting.
INTRODUCTION
Immune checkpoint inhibitors (ICIs) have revolutionized the treatment of cancer, but preclinical testing of hypotheses such as combination therapies has been complicated, in part due to species incompatibility issues. For example, one of few known permissive animal models for oncolytic adenoviruses is the Syrian hamster, for which an ICI, mainly an anti-PD-L1 monoclonal antibody (mAb) was not previously available. In this study, we developed an anti-Syrian hamster PD-L1 mAb to enable the evaluation of safety and efficacy, when combining anti-PD-L1 with an oncolytic adenovirus encoding tumour necrosis factor alpha (TNFα) and interleukin-2 (IL-2) (Ad5/3-E2F-D24-hTNFα-IRES-hIL-2 or TILT-123).
METHODS
Recombinant Syrian hamster PD-L1 was expressed and mice immunized for mAb formation using hybridoma technology. Clonal selection through binding and functional studies in vitro, in silico and in vivo identified anti-PD-L1 clone 11B12-1 as the primary mAb candidate for immunotherapy modelling. The oncolytic virus (OV) and ICI combination approach was then evaluated using 11B12-1 and TILT-123 in a Syrian hamster model of pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC).
RESULTS
Supernatants from hybridoma parent subclone 11B12B4 provided the highest positive PD-L1 signal, on Syrian hamster PBMCs and three cancer cell lines (HT100, HapT1 and HCPC1). In vitro co-cultures revealed superior immune modulated profiles of cell line matched HT100 tumour infiltrating lymphocytes when using subclones of 7G2, 11B12 and 12F1. Epitope binning and epitope prediction using AlphaFold2 and ColabFold revealed two distinct functional epitopes for clone 11B12-1 and 12F1-1. Treatment of Syrian hamsters bearing HapT1 tumours, with 11B12-1 induced significantly better (p<0.05) tumour growth control than isotype control by day 12. 12F1-1 did not induce significant tumour growth control. The combination of 11B12-1 with oncolytic adenovirus TILT-123 improved tumour growth control further, when compared to monotherapy (p<0.05) by day 26.
CONCLUSIONS
Novel Syrian hamster anti-PD-L1 clone 11B12-1 induces tumour growth control in a hamster model of PDAC. Combining 11B12-1 with oncolytic adenovirus TILT-123 improves tumour growth control further and demonstrates good safety and toxicity profiles.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.