MedElevator
Войти в исследования Упрощенная модель SARS-COV-2 демонстрирует защиту с помощью пероральной вакцины на основе mRNA.
Аннотация
Модель мыши SARS-COV-2, которая может быть разработана в любой лаборатории молекулярной биологии со стандартными средствами, будет иметь важное значение для оценки лекарств и вакцин. Здесь мы представляем упрощенную модель мыши SARS-COV-2 с использованием метода быстрой аденовиральной очистки. Мыши, чувствительные к инфекции SARS-COV-2, были образованы аденовичным ангиотенсином человека, предотвращающим фермент 2 (HACE2). Выражение " кинетика " HACE2 в мышах, получавших образование, оценивалось иммуногистохимией, RT-PCR и qPCR. Кроме того, была определена способность HACE2 поддерживать репликацию вирусов in vitro и in vivo. Выражение hACE2 в легких мышей было замечено в течение не менее девяти дней после трансдукции. Муриновые макрофаги, выражающие hACE2, поддерживали вирусное воспроизведение с обнаружением высоковирусных титер. Затем в vivo были проведены исследования для выявления вирусного репликации и заболеваний легких после решения проблемы SARS-COV-2. Модель поддерживала вирусное воспроизведение, и мышь, сталкивающаяся с проблемами, развила болезнь легких, характерную для умеренной межститиальной пневмонии. Кроме того, мы продемонстрировали полезность этой системы, продемонстрировав ее защиту с помощью пероральной вакцины MRNA. Мультицистронная вакцина, разработанная с помощью вирусных самоклеющихся пептидов, предназначена для связывания рецептора (RBD), повторной области гептада (HR), мембранного гликопротеина (M) и эпитопов nsp13 родительского ARS-COV-2. Кроме того, репликон вируса Salmonella и Semliki Forest использовались соответственно для передачи генов и выражения mRNA. Мы записали мощную перекрестную нейтрализацию антител в прививках мышей против дельта-варианта SARS-COV-2. Вакцина защищала мышей от вирусного репликации и вызванной SARS-COV-2 потери веса и легочной патологии. Полученные результаты подтверждают пригодность модели для предклинической оценки методов лечения и вакцин против SARS-COV-2. Кроме того, полученные результаты позволяют получить новое представление о разработке вакцины против инфекционных заболеваний, не ограничивающейся САРС-Ков-2.
Название и аннотация на языке оригинала
A Simplified SARS-CoV-2 Mouse Model Demonstrates Protection by an Oral Replicon-Based mRNA Vaccine.
A mouse model of SARS-CoV-2 that can be developed in any molecular biology lab with standard facilities will be valuable in evaluating drugs and vaccines. Here we present a simplified SARS-CoV-2 mouse model exploiting the rapid adenoviral purification method. Mice that are sensitive to SARS-CoV-2 infection were generated by transducing human angiotensin-converting enzyme 2 (hACE2) by an adenovirus. The expression kinetics of the hACE2 in transduced mice were assessed by immunohistochemistry, RT-PCR, and qPCR. Further, the ability of the hACE2 to support viral replication was determined in vitro and in vivo. The hACE2 expression in the lungs of mice was observed for at least nine days after transduction. The murine macrophages expressing hACE2 supported viral replication with detection of high viral titers. Next, in vivo studies were carried out to determine viral replication and lung disease following SARS-CoV-2 challenge. The model supported viral replication, and the challenged mouse developed lung disease characteristic of moderate interstitial pneumonia. Further, we illustrated the utility of the system by demonstrating protection using an oral mRNA vaccine. The multicistronic vaccine design enabled by the viral self-cleaving peptides targets receptor binding domain (RBD), heptad repeat domain (HR), membrane glycoprotein (M) and epitopes of nsp13 of parental SARS-CoV-2. Further, Salmonella and Semliki Forest virus replicon were exploited, respectively, for gene delivery and mRNA expression. We recorded potent cross-protective neutralizing antibodies in immunized mice against the SARS-CoV-2 delta variant. The vaccine protected the mice against viral replication and SARS-CoV-2-induced weight loss and lung pathology. The findings support the suitability of the model for preclinical evaluation of anti-SARS-CoV-2 therapies and vaccines. In addition, the findings provide novel insights into mRNA vaccine design against infectious diseases not limiting to SARS-CoV-2.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.