MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1007/s12033-021-00408-6
Доставка анти-IFNAR1 SRNA в герпатические клетки уменьшает генной экспрессии IFNAR1 и улучшает аденовиральную трансдукцию и трансгенное экспрессию.
Аннотация
Хроническая травма печени приводит к продвинутому фиброзу, циррозу и гепатоцеллюлярной карциноме. Генетическая клеточная терапия, связанная с использованием аденовируса (Ад), доказала свою полезность и эффективность в восстановлении печени. Тем не менее, они высоко иммуногенны и вызывают иммунную реакцию, когда интерфероны типа 1 (IFN-I) играют очень важную роль. Три SRNA против рецептора Interferon-1 (IFNAR1) были спроектированы и клонированы в плазмиде PENTR/U6 и увеличены в камерах DH5α. Клетки Huh7 были перезаражены этими плазмидами в присутствии или отсутствии 1 × 109 вирусных частиц/мл аденовируса, содержащих зеленый флуоресцентный белковый ген, используемый в качестве репортера. Трансфекция плазмидами SRNA частично ингибировала выражение IFNAR1. Это ингибирование существенно уменьшило антивирусную реакцию, о чем свидетельствует уменьшение экспрессии генов IFNAR1, IFN-α и TNF-α, а также снижение уровня белка IFNAR1, Protein cinase RNA-активирован (PKR) и фосфоролед STAT1, что позволяет повысить аденовиральную трансдукцию и экспрессию трансгена. Интересно, что было замечено, что SRNA ингибировала макрофаг. Эти результаты свидетельствуют о том, что ингибирование траектории IFN-I может стать стратегией сведения к минимуму иммунной реакции на аденовиральные векторы, что позволит повысить трансдукцию аденовируса, расширяя экспрессию трансгена.
Название и аннотация на языке оригинала
Delivery of Anti-IFNAR1 shRNA to Hepatic Cells Decreases IFNAR1 Gene Expression and Improves Adenoviral Transduction and Transgene Expression.
Chronic liver injury leads to advanced fibrosis, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. Genetical cell treatment related to the use of adenovirus (Ads) has proven to be beneficial and efficient in the recovery of hepatic diseases. Nevertheless, they are highly immunogenic and trigger an immune response where interferons type 1 (IFN-I) play a very important role. Three shRNAs against the Interferon-1 receptor (IFNAR1) were designed and cloned in pENTR/U6 plasmid and amplified in DH5α cells. Huh7 cells were transfected with these plasmids in the presence or absence of 1 × 109 viral particles/ml of adenovirus containing the green fluorescent protein gene used as a reporter. Transfection with the shRNA plasmids partially inhibited the IFNAR1 expression. This inhibition substantially decreased antiviral response, demonstrated by the decrease of IFNAR1, IFN-α, and TNF-α gene expression, and the decrease at protein levels of IFNAR1, Protein kinase RNA-activated (PKR), and phosphorylated STAT1, allowing higher adenoviral transduction and transgene expression. Interestingly it was seen shRNA inhibited macrophage activation. These results suggest that the inhibition of the IFN-I pathway could be a strategy to minimize the immune response against Adenoviral vectors allowing higher Adenovirus transduction extending the transgene expression.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.