MedElevator
Войти в исследования DOI 10.12688/f1000research.20135.2
Изоляция и первоначальное распространение аденовируса свиньи (GPADV) в клеточных линиях Кавиа-порселюса.
Аннотация
Справочная информация: Отсутствие адекватных систем in vitro для изолирования и распространения аденовируса свиньи (GPADV), являющегося широко распространенной причиной респираторных заболеваний изобильной силы в лабораторных колониях свиньи-морекопии во всем мире, не позволило получить формальную характеристику, позволяющую разработать всеобъемлющие диагностические анализы, а также провести сложные патогенезы и базовые вирологические исследования.
Методы
два штамма ГПДД были изолированы в клетках морских свиней (Cavia porcellus) от замороженных архивных зараженных животных тканей, образовавшихся в результате вспышек пневмонии в Австралии и Чешской Республике в 1996 году.
Результаты
Коммерческие линии морских свиных клеток из клинектальной карциномы (GPC-16), фибробласта плода (104-C1) и фибробалста легких (JH4 C1) и трахеальная эпителиальная клеточная линия GPTEC-T, разработанная в ходе этого исследования, смогли поддержать вирусную инфекцию и раннее распространение. Достаточная вирусная ДНК была извлечена из клеток культур, чтобы PCR-амплировать и получить данные о последовательности полных генов гексонов и частичных полимеразы ДНК и базовых генов пентона. Филиогенетический анализ по трем регионам генома дал убедительные доказательства того, что ГПДД является уникальным видом в роде Мастаденовирус.
Выводы
Это исследование продемонстрировало целесообразность пропаганды ГПДД в культурах бессмертных линий клеток ГП различных типов, заложив тем самым важнейшую основу для создания прочной культурной платформы для производства и титрации вирусных веществ. Выработка и анализ целых последовательности геномов ГПДДВ позволит получить дополнительные данные для всеобъемлющего описания генетической организации вирусного генома и для лучшей оценки генетического разнообразия между двумя изолированными штаммами.
Название и аннотация на языке оригинала
Isolation and initial propagation of guinea pig adenovirus (GPAdV) in Cavia porcellus cell lines.
Background
The lack of adequate in vitro systems to isolate and propagate guinea pig adenovirus (GPAdV), a prevalent cause of respiratory illness of varaible severity in laboratory guinea pig colonies worldwide, has precluded its formal characterization to allow for the development of comprehensive diagnostic assays, and for the execution of complex pathogenesis and basic virology studies.
Methods
Two strains of GPAdV were isolated in guinea pig ( Cavia porcellus) cell cultures from frozen archival infected animal tissue originated from colony outbreaks of pneumonia in Australia and the Czech Republic in 1996.
Results
Commercially available guinea pig cell lines from colorectal carcinoma (GPC-16), fetal fibroblast (104-C1) and lung fibroblast (JH4 C1), and the tracheal epithelial cell line GPTEC-T developed in this study were able to support viral infection and early propagation. Sufficient viral DNA was recovered from cell cultures to PCR-amplify and obtain sequence data for the complete hexon gene and partial DNA polymerase and penton base genes. Phylogenetic analysis for the three regions of the genome provided strong evidence confirming GPAdV as a unique species in the genus Mastadenovirus.
Conclusions
This study demonstrated the feasibility of propagating GPAdV in cultures of immortalized lines of GP cells of a variety of types, thus establishing a critical foundation for the development of a robust culture platform for virus stock production and titration. The generation and analysis of whole GPAdV genome sequences will provide additional data for a comprehensive description of the genetic organization of the viral genome and for a better assessment of genetic diversity between the two isolated strains.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.