Метод цитометрии, основанный на потоке, для определения тира аденовирусов, выражающих экстрагенитальный ген.

В последнее время онколитические вирусы, выражающие внешний ген, вызывают большой интерес; на самом деле, они используются в различных видах применения, таких как лекарство от рака. Наша группа сделала онколитический аденоврус, а именно OBP-301, для использования в лечении твердых раковых заболеваний и в клинических испытаниях для прессы, с тем чтобы получить разрешение на фармацевтический продукт. В этом исследовании мы применили метод, основанный на цитометрии потока, для определения титера аденовирусов, выражающих внешний ген, а также для оценки их качества. Мы рассматривали использование зеленого флуоресцентного белка (GFP)50 титера в качестве показателя вирусного качества. Titer GPF50 (GPF50/mL) — вирусная нагрузка, необходимая для того, чтобы сделать клеточную линию HeLa S3 на 50% позитивной GPF путем анализа цитометрических данных потока. Мы измерили три типа рекомбинированных аденовирусов GPF50 (OBP-401, OBP-1101 и OBP-1106). Мы сравнили инфекционную дозу GFP50/мл и инфекцию культуры тканей (TCID50/мл), которая является традиционным индексом титрации, и обнаружили, что эти тироны имеют линейную корреляцию с коэффициентом корреляции >0,9. Кроме того, GPF50/мл продемонстрировали высокую повторяющуюся точность. Мы ожидаем, что этот метод, основанный на цитометрии потока, будет полезен в случае клинически значимых вирусов, выражающих внешний ген, в частности, для контроля вирусного качества.