MedElevator
Войти в исследования Обширный пептидный лигандный обмен по классу поверхности I - основные гистокомпьютерные сложные молекулы, не зависящие от внешнего бета-2-микроглобулина.
Аннотация
Определенный класс I - основные гистосопоставимые сложные молекулы, выраженные на живых клетках, были продемонстрированы как связывающие экзогенные пептиды. Однако остается спорным вопрос о том, происходит ли это с помощью пептидного обмена или же с помощью пустых молекул класса поверхности I. В этом отчете мы сравниваем поверхностное связывание и диссоциацию двух вирусных лигандов молекулы Ld класса I мыши. Пептидные лиганды ранее были определены в иммунной реакции на цитомегаловирус или лимфохориомингит как иммунодоминант, оптимальный размер и Ld. Диссоциация лигандов отслеживалась на живых клетках косвенным образом путем измерения поверхностного оборота Ld-peptide комплексов или непосредственно с использованием маркированных пестидов. Пептиды, полученные из цитомегаловируса и лимфохориомингита, как представляется, относительно быстро разъедают друг друга; однако Пептид, полученный из цитомегаловируса, имеет более быстрые темпы, чем Пептид, полученный из лимфохориоменингита. Кроме того, эти темпы диссоциации, как представляется, охватывают и эндогенные пептиды Ld, выраженные в клетках при 37 градусах C. Эксплуатация необычайной доступности поверхностного связующего участка Ld Ligand мы разработали аттестацию для квантового обмена пептидным лигандом. Клетки были предварительно обработаны сажировыми количествами немаркированного пептида в результате ночных инкубаций, а затем прошли проверку на вторичную связывание маркированных пептидов в 4-часовом анализе. Наши результаты однозначно показывают, что молекулы поверхности I могут подвергаться пептидному обмену. Кроме того, был сделан вывод о том, что пептидный обмен во многом не зависит от внешнего бета-2-микроглобулина. Этот результат предполагает, что бета-2-микроглобулинная связь, а не бета-2-микроглобулиновый обмен является критическим фактором при обмене пестидом на молекулы класса поверхности I. Из-за изысканной способности Т клеток дискриминировать различные количества лигандов, связанных с классом I, связывание внешних пептидов может сыграть решающую роль в нормальном или аберрированном иммунном реагировании.
Название и аннотация на языке оригинала
Extensive peptide ligand exchange by surface class I major histocompatibility complex molecules independent of exogenous beta 2-microglobulin.
Certain class I major histocompatibility complex molecules expressed on live cells have been shown to bind exogenous peptide ligands. However, it remains controversial whether this binding occurs by peptide exchange or to empty surface class I molecules. In this report we compare the surface binding and dissociation of two virus-derived ligands of the Ld class I molecule of the mouse. The peptide ligands were previously identified in immune responses to cytomegalovirus or lymphochoriomeningitis virus as immunodominant, optimally sized, and Ld restricted. Ligand dissociation was monitored on live cells indirectly by measuring the surface turnover of Ld-peptide complexes or directly by using labeled peptides. The cytomegalovirus-derived and lymphochoriomeningitis virus-derived peptides appeared to dissociate relatively rapidly; however, the cytomegalovirus-derived peptide had a more rapid off-rate than the lymphochoriomeningitis-derived peptide. Furthermore, these rates of dissociation appear to span that seen with endogenous Ld-associated peptides expressed by cells at 37 degrees C. Exploiting the extraordinary accessibility of the surface Ld ligand binding site we developed an assay to quantitate peptide ligand exchange. Cells were precoated with saturating amounts of unlabeled peptide by overnight incubation and were then tested for secondary binding of labeled peptides in a 4-h assay. Our results unequivocally demonstrate the potential for surface class I molecules to undergo peptide exchange. Furthermore, peptide exchange was found to be largely independent of exogenous beta 2-microglobulin. This result implies that beta 2-microglobulin association and not beta 2-microglobulin exchange is the critical factor in peptide exchange by surface class I molecules. Because of the exquisite ability of T cells to discriminate different amounts of ligand bound to class I, the binding of exogenous peptides could play a critical role in normal or aberrant immune responses.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.