MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1080/21691401.2016.1216860
Одна клеточная модель для подавления выражения CAMKII мRNA в нейроне дорсального корня с помощью RNA.
Аннотация
CAMKII в дорсальных ганглионах тесно связан с нейропатической болью, нейронной травмой, вызванной местной анестезией. Чтобы получить полное представление о функции CaMKII в нейронах дорсального корня, нам нужна одна клеточная модель, специально ингибирующая выражение CAMKII. mRNA. Цель настоящего исследования состояла в том, чтобы создать одну клеточную модель, специально препятствующую выражению CAMKII. mRNA. Мы спроектировали последовательность CAMKII, соединенную с PYr-1.1 плазмидом. Продукт перевязки CAMKII shRNA и pYr-1.1 плазмида был перекомбинирован с вектором PAD/PL-DEST в вектор PAD-CaMKII-shRNA. аденовирусный вектор pAD-CaMKII-shRNA. аденовирусный вектор заразил нейрон дорсального корня, чтобы ингибировать выражение CAMKII / mRNA in vitro. Вектор аденовируса PAD-CaMKII-shRNA был подтвержден правильностью пищеварения, последовательности. И paD-CaMKII-shRNA. аденовирусный вектор может заразить клетки DRG, чтобы ингибировать CAMKII/mRNA или белковое выражение с помощью цепной реакции полимеразы в реальном масштабе времени (PCR) или западного пятна. Эти результаты показали, что мы успешно создали один аденовирусный вектор, который может заразить нейрон дорсального корня, чтобы ингибировать камКII мРНК и белковое выражение. Это позволит создать одну клеточную модель для исследования функций CAMKII.
Название и аннотация на языке оригинала
One cell model establishment to inhibit CaMKIIγ mRNA expression in the dorsal root ganglion neuron by RNA interfere.
CaMKIIγ in dorsal root ganglion neurons is closely related to the neuropathic pain, neuron injury induced by local anesthetics. To get great insight into the function of CaMKIIγ in dorsal root ganglion neurons, we need one cell model to specially inhibit the CaMKIIγ mRNA expression. The present study was aimed to establish one cell model to specially inhibit the CaMKIIγ mRNA expression. We designed the CaMKIIγ shRNA sequence and connected with pYr-1.1 plasmid. The ligation product of the CaMKIIγshRNA and pYr-1.1 plasmid was recombined with pAd/PL-DEST vector into pAD-CaMKIIγ-shRNA. adenovirus vector. pAD-CaMKIIγ-shRNA. adenovirus vector infected the dorsal root ganglion neuron to inhibit the CaMKIIγ mRNA expression in vitro. The pAD-CaMKIIγ-shRNA adenovirus vector was verified to be correct by the digestion, sequence. And pAD-CaMKIIγ-shRNA. adenovirus vector can infect the DRG cells to inhibit the CaMKIIγ mRNA or protein expression by the real-time polymerase chain reaction (PCR) or western blotting. Those results showed that we successfully constructed one adenovirus vector that can infect the dorsal root ganglion neuron to inhibit the CaMKIIγ mRNA and protein expression. That will supply with one cell model for the CaMKIIγ function study.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.