Разработка высоковоспроизводимой системы для оценки ингибирования цитохромной активности P450 3A4 с помощью естественных лекарственных средств.

ЦЕЛЬ

Согласно сообщениям, в последние годы ряд естественных лекарственных средств оказывает индуктивное или сдерживающее воздействие на деятельность энзимов метаболизма при совместном управлении с предписанными лекарствами. Однако из-за отсутствия эффективного метода скрининга для такого взаимодействия информация о взаимодействии между естественной медициной и наркотиками, влияющих на метаболизм наркотиков, является ограниченной. Поэтому для того, чтобы понять, влияет ли на активность P450 натуральная медицина на маленьких кишечниках, мы создали замороженные рекомбинантные клетки P450-выражающие клетки, зараженные аденовирусом человека CYP3A4 (Ad-CYP3A4) для оценки воздействия естественных лекарственных препаратов на активность CYP3A4.

МЕТОДЫ

Клетки ад-CYP3A4 были созданы путем заражения клеток HepG2 с помощью AD-CYP3A4 при 10 множестве инфекций (MOI), и эти клетки хранились с помощью криопасных средств (fAD-CYP3A4) для получения долгосрочных последовательных данных и стабильных поставок клеток, отражающих постоянный уровень активности CYP3A4.

Результаты

Деятельность CYP3A4 в камерах fAD-CYP3A4 оставалась нетронутой в конце каждого периода замороженности (0, 1, 2 и 6 месяцев). Была проведена оценка негибкого воздействия на активность CYP3A4 типичных ингибиторов (кетоконазол, гиперфорин) и естественных лекарственных препаратов (Кэтс Клаус, Дьявольский Когт, Feverfew, Peppermint Oil, Red Clover и Sybrin Eleuthero). Ингибиторы имели почти равные значения IC50 в клетках fAD-CYP3A4, AD-CYP3A4 и рекомбинантных микросомах CYP3A4. Коготь, Пепперминт Ойл и Сибирская Элеутеро ингибировали активность CYP3A4 более мощно, чем 0,1 мкг кетоконазол в клетках fAD-CYP3A4.

ВЫВОДЫ

В настоящем исследовании мы успешно разработали высоковоспроизводимую систему для оценки ингибирования CYP3A4 в малых кишечниках с помощью естественных лекарственных средств.