MedElevator
Войти в исследования Отмена сигнала TGF-β/Smad2 с помощью GW788388 усиливает расчистку DENV-2 в макрофаге.
Аннотация
Гнездовая лихорадка, вызванная вирусом денге (DENV-1, -2, -3 и -4), затрагивает миллионы людей в тропических и субтропических регионах мира. Тяжелая денге коррелирует с высокой виремией и цитокиновой бурей, такими, как высокие уровни преобразующего фактора роста β1 (TGF-β1) в сыворотке пациента. В данном случае, сигнализация TGF-β1 была исследована в контексте внутривитровирусной расчистки. Макрофаги были заражены DENV-2 при MOI 5 и обработаны рецептором TGF-β 1 и 2, GW788388. Выражения TGF-β1, трансдукции сигнала и вирусная нагрузка были оценены через 48 часов после инфекции DENV-2 с помощью иммуномассы, связанной с ферментом, иммунофлюоресценции и анализа RT-qPCR. Общий уровень TGF-β1 был сокращен на 15% после заражения DENV-2, но секреция его биологической активности возросла втрое во время инфекции, за которой последовало фосфорилирование белка Smad2. Фосфорилирование Smad2 было сокращено в результате лечения с помощью GW788388 и было связано с сокращением производства цитокина. Важно отметить, что лечение привело к снижению вирусной нагрузки в зависимости от дозы: от 6,6 × 105 копий РНК/мл в неочищенных культурах до 2,3 × 103 копий РНК/мл в культурах, обработанных 2 нг/мл GW788388. Лечение антител анти-ТГФ-β1 также привело к значительному снижению вирусной нагрузки до 1,6 × 103 копий/мл РНК. С другой стороны, добавление рекомбинанта TGF-β1 в зараженных культурах способствовало увеличению вирусной нагрузки до 7,0 × 106 копий РНК/мл. Эти результаты подтверждают, что TGF-β1 играет важную роль в воспроизведении DENV-2 в макрофаге, и говорят о том, что целевое применение TGF-β1 может представлять собой альтернативную терапевтическую стратегию, которую следует изучить в связи с инфекцией денге.
Название и аннотация на языке оригинала
Suppression of TGF-β/Smad2 signaling by GW788388 enhances DENV-2 clearance in macrophages.
Dengue fever, caused by the dengue virus (DENV-1, -2, -3, and -4), affects millions of people in the tropical and subtropical regions worldwide. Severe dengue is correlated with high viraemia and cytokine storm, such as high levels of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) in the patient's serum. Here, the TGF-β1 signaling was investigated in the context of in vitro viral clearance. Macrophages were infected with DENV-2 at MOI 5 and treated with the TGF-β receptor 1 and 2 inhibitor, GW788388. TGF-β1 expression, signal transduction and viral load were evaluated 48 h after DENV-2 infection by enzyme-linked immunoassay, immunofluorescence, and RT-qPCR assays. Total TGF-β1 level was reduced in 15% after DENV-2 infection, but the secretion of its biologically active form increased threefold during infection, which was followed by the phosphorylation of Smad2 protein. Phosphorylation of Smad2 was reduced by treatment with GW788388 and it was correlated with reduced cytokine production. Importantly, treatment led to a dose-dependent reduction in viral load, ranging from 6.6 × 105 RNA copies/ml in untreated cultures to 2.3 × 103 RNA copies/ml in cultures treated with 2 ng/ml of GW788388. The anti-TGF-β1 antibody treatment also induced a significant reduction in viral load to 1.6 × 103 RNA copies/ml. On the other hand, the addition of recombinant TGF-β1 in infected cultures promoted an increase in viral load to 7.0 × 106 RNA copies/ml. These results support that TGF-β1 plays a significant role in DENV-2 replication into macrophages and suggest that targeting TGF-β1 may represent an alternative therapeutic strategy to be explored in dengue infection.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.