Chikungunya virus, a mosquito-borne alphavirus, poses a significant global health threat due to its rapid spread and lack of approved antiviral therapies. The viral nonstructural protein 2 protease (nsP2p) plays a critical role in processing the viral polyprotein to produce key viral enzymes, making it an attractive target for drug development. In this study, we describe the expression and purification of recombinant CHIKV nsP2 protease and establish a robust fluorogenic assay to measure its enzymatic activity using the acc-CHIK15-dnp peptide substrate. The assay enables real-time monitoring o
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Cas9-guide RNA ribonucleoprotein (RNP) complexes are widely used for genome editing because they provide rapid, transient nuclease activity without introducing exogenous DNA into target cells. Efficient RNP delivery requires a highly purified, correctly folded Cas9 protein that is free of contaminating nucleases and small-molecule impurities. This chapter describes the expression of N-terminally His-tagged Cas9 from a pET28b vector in Escherichia coli Rosetta strains, followed by purification using Ni-NTA immobilized metal affinity chromatography (IMAC) and size exclusion chromatography (SEC)
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Sugar fatty acid esters have a wide range of applications in food, cosmetic, detergent, and pharmaceutical industries due to their excellent surface and antimicrobial properties. Additionally, some sugar esters are insecticides and acaricides. In this work, we described the enzymatic synthesis of lactulose monoesters, their purification, and qualitative and quantitative chromatographic analysis.
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
High-throughput sequencing of total RNA has permitted the detection of novel mycoviruses in fungi with different types of genomes, including mycoviruses with double-stranded RNA, single-stranded positive- or negative-stranded RNA, or single-stranded DNA genomes. However, in silico detection of mycoviruses is not always sufficient to guarantee their presence in sequenced samples, especially in the case of the discovery of unique mycoviruses, and additional analyses are required to validate in vivo the data obtained by bioinformatics analysis. This chapter provides comprehensive protocols for th
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Using Botrytis cinerea (ATCC 58025) as the material, genomic DNA was extracted using the SDS-CTAB method after liquid nitrogen freezing and extracted multiple times with organic reagents. Then the precipitate was washed with ethanol and dissolved in TE buffer. The cultured genomic DNA is high-yield, easy to extract, and has good purity, making it suitable for extracting from multiple samples at once. After experiments, the genomic DNA obtained by this method can be used for most basic molecular biology experiments such as PCR and DNA enzyme digestion.
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Chikungunya virus (CHIKV) represents a significant global health threat due to its recent resurgence. This protocol highlights the use of capillary-modified visual loop-mediated isothermal amplification (LAMP) technology for the rapid detection of CHIKV. We employed Vero cells for virus propagation and utilized the MolPure Viral DNA/RNA Kit for nucleic acid extraction, successfully amplifying extracted viral RNA at 63°C for 25 min. The presence of CHIKV was indicated by a distinct yellowish-green color change, demonstrating the effectiveness and simplicity of this protocol. Our protocol unders
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Chikungunya virus (CHIKV) is transmitted through the bite of Aedes mosquitoes, specifically A. aegypti and A. albopictus. CHIKV belongs to the alphavirus with a positive-sense ssRNA genome of 11-12 kb size. The virus has been reported from various geographical regions across the globe. Chikungunya fever is an acute febrile illness, which, if left untreated, may develop into chronic arthralgia that may persist for several months or acute encephalitis syndrome. Therefore, early diagnosis of CHIKV is crucial to initiate prompt supportive treatment. Laboratory diagnosis of CHIKV typically relies o
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
RT-qPCR is characterized by high sensitivity, strong specificity, excellent reproducibility, and operational simplicity, enabling rapid quantification of viral RNA within a short timeframe. The real-time PCR system relies upon the measurement of a fluorescent reporter during PCR, in which the amount of emitted fluorescence is directly proportional to the amount of the PCR product in a reaction. Here, we describe the use of TaqMan® probe-based one-tube Real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) for the detection and quantification of the Chikungunya viru
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Histopathological analysis of tissues infected with Chikungunya virus (CHIKV), including biopsy and autopsy specimens, can provide valuable insights into the pathogenesis of atypical and fatal cases. By examining tissue architecture and cellular alterations under the microscope, it is possible to identify patterns of injury, inflammation, and cellular degeneration. These morphological findings provide evidence of how the pathogen interacts with host cells and tissues. Moreover, immunohistochemistry may be performed in tissue sections for the detection of viral antigens. Importantly, this techn
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The processing of adult mosquitoes collected in the field for studies of natural infection with arboviruses of public health interest (genera: Flavivirus, Alphavirus, Orthobunyavirus) follows the assembly of homogenized mosquito pools and extraction of genetic material using commercial or manual techniques, and the detection of viral RNA by polymerase chain reaction (nested RT-PCR) [11]. This paper describes the procedures for capturing, taxonomic determination, obtaining genetic material, and molecular techniques for detecting alphaviruses.
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Arboviral diseases represent a major public health challenge, especially in tropical regions where environmental conditions may favor the proliferation and spread of mosquito vectors. Thus, early and accurate detection of chikungunya virus (CHIKV) in mosquito populations can be a valuable tool for effective surveillance of circulating variants and for identifying new viral introductions. Given the challenges of detecting arboviruses in field-captured mosquitoes, we describe an integrated workflow for CHIKV molecular detection and whole-genome sequencing. This protocol includes mosquito homogen
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Despite a high level of conservation within its core genome, the Chlamydia genus comprises various species that exhibit diverse pathogenic profiles. Genetic engineering techniques employing shuttle vectors are crucial tools for elucidating the pathogenesis of these obligate intracellular bacteria. In recent years, the introduction of calcium chloride-mediated transformation methods has significantly advanced genetic manipulation techniques for Chlamydia trachomatis. However, the efficiency of transformation using shuttle vectors, as well as plasmid maintenance, varies not only between Chlamydi
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Chlamydia trachomatis (CT) causes genital tract infection in humans, but the clinical significance of C. trachomatis detection in the gastrointestinal (GI) tract is an area of active research. Chlamydia muridarum (CM) is a mouse-adapted species used to investigate chlamydial biology and pathogenicity in both the genital and gastrointestinal tracts. Since chlamydial colonization of different segments of the GI tract may lead to distinct consequences, quantifying chlamydial yields across these regions will facilitate understanding of chlamydial biology and pathogenicity. This chapter describes a
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The recent application of experimental and computational drug discovery workflows has identified hundreds of new molecules that display potent, and in some cases highly selective, activity against bacteria of the genus Chlamydia. The full value of these novel antichlamydial molecules, however, depends critically on our ability to determine their molecular targets and modes of action. A particularly powerful and widely applied strategy for identifying candidate targets involves selecting for bacterial mutants that have acquired resistance to a compound's inhibitory activity, followed by determi
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The plaque-forming assay is the gold-standard method for measuring infectious viral particles. In this technique, lytic viruses infect and destroy host cells, but their spread is restricted by a viscous overlay medium. As a result, new viral particles can only infect neighboring cells, leading to localized clear areas known as plaques, which become visible after staining the remaining living cells. The number of plaques reflects the number of infectious viral particles initially present in the sample and is reported as plaque-forming units (PFU) per sample volume. In this protocol, we describe
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Chikungunya virus (CHIKV) is a human pathogenic, mosquito-borne virus (arbovirus), which is causing epidemic outbreaks among human populations in Africa, Asia, Europe, and South- and Central America including the Caribbean. The development of novel approaches to prevent mosquito transmission of the virus in the field requires a detailed study of CHIKV interactions with its mosquito vectors in the laboratory. In this chapter, we describe how to prepare Aedes aegypti mosquitoes for the infection with freshly cultivated CHIKV. We also describe quantitative and qualitative viral detection assays i
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The study of intestinal stem cells is crucial for developing therapies for gut regeneration. Using Tet-Op histone 2 B (H2B)-green fluorescent protein (GFP) fusion protein transgenic mouse, we have developed a three-dimensional small intestinal (SI) organoid culture model in which cells with different cell cycle durations can be distinguished, allowing real-time visualization of the kinetics of slow-cycling H2B-GFP-retaining putative SI epithelial stem cells. The model allows real-time monitoring of the behavior of H2B-GFP-retaining putative SI stem cells under basal conditions, of their respon
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Organoids and fibroblasts derived from patient tissue serve as physiologically meaningful in vitro models to investigate tissue biology, diseases, and treatment responses. In this study, we present a robust protocol for the simultaneous isolation and long-term culture of patient-derived organoids (PDOs) and fibroblasts from both healthy and colorectal cancer samples. The workflow uses enzymatic dissociation followed by efficient separation into epithelial and stromal cell fractions. Organoids are embedded in Matrigel or Matrigel-Collagen I mixtures to support three-dimensional growth, whereas
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Cheese whey is a widely available agri-food byproduct whose high organic load presents significant challenges for the dairy industry and environmental management. Its biovalorization into high-value, sustainable functional lipids is increasingly important given the environmental concerns associated with conventional vegetable oil production. This study examines the isolation, identification, and characterization of a wild-type yeast strain capable of synthesizing oleic acid-rich oil from cheese whey. Screening six different sources yielded thirteen microbial isolates capable of growing on whey
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Extensive research has been conducted on plant-derived polysaccharides, yet three interrelated challenges remain insufficiently explored: extraction methods are often selected without systematic validation; the structure-activity relationship (SAR) remains fragmented; and modification strategies are rarely designed on the basis of SAR knowledge. This article systematically summarizes three key aspects: extraction, SAR, and structural modification. We critically compare various extraction techniques and clarify that method selection requires consideration of source characteristics and applicati
СтатьяОбзорПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
MedElevator
Войти в исследования