Воздействие аденовирусной инфекции в метаболизме принимающих клеток, оцениваемое с помощью (1) спектроскопии " H-NMR " .

Векторы, основанные на аденовирусе, являются мощным средством передачи генов в ходе вакцинации и генной терапии. Хотя ключевые аспекты аденовирусной биологии и широко используются в клинической среде, до сих пор не вполне понятны, в частности подрыв метаболизма принимающих клеток во время вирусной инфекции и репликации. Цель этой работы состояла в том, чтобы получить представление о метаболизме двух линий клеток человека (HEK293 и амниоцитная линия клеток, 1G3) после инфекции аденовирусным серотипом 5 (ADV5). Чтобы описать метаболические изменения, мы использовали (1) спектроскопию H-NMR, которая позволила количественно определить 35 метаболитов в супернатантах клеточной культуры с низким уровнем подготовки проб и за относительно короткое время. Были выявлены значительные различия между двумя клеточными линиями в незагрязненных культурах, а именно в метаболизме глютамина и ацетатата, а также в секреции побочных продуктов. Основным ответом на инфекцию ADV5 было увеличение потребления глюкозы и темпов ее производства. Кроме того, культуры, проводившиеся с добавкой глютамина или без нее, подтвердили истощение этой аминокислоты в качестве одной из основных причин более низкого уровня производства адV5 при высокой плотности клеток (10- и 1,5-кратно менее специфической урожайности в клетках HEK293 и 1G3 соответственно) и выявили различные степени зависимости глютамина от воспроизведения аденовируса в каждой клеточной линии. Наблюдаемые метаболические изменения, связанные с инфекцией " АдВ5 " , и специфичность проводной линии клеток могут быть полезными для целенаправленной оптимизации биопроцесса.